ИФА и ПЦР: чем отличаются и что значат IgG и IgM в бланке
ИФА ищет антитела, ПЦР — самого возбудителя. Что значит IgG+ IgM−, что такое коэффициент позитивности и серая зона, сколько длится «окно» при ВИЧ и гепатитах.
«IgG положительно, IgM отрицательно» — я болею или болел?
Это самый частый вопрос к бланкам на антитела, и ответ в нём уже написан, просто нужен ключ. Два метода, которые печатают на таких бланках, отвечают на разные вопросы. ИФА спрашивает организм: «ты встречался с этим возбудителем?». ПЦР спрашивает пробирку: «возбудитель здесь сейчас?». Отсюда и разные сроки, и разные единицы, и привычка врачей просить один анализ после другого.
ИФА: анализ ищет не вирус, а память о нём
Иммуноферментный анализ, описанный в 1971 году, ловит антитела: белки, которые иммунная система вырабатывает в ответ на возбудитель. Их два основных класса, и в них главная подсказка.
IgM появляются первыми, обычно через 1–2 недели после заражения, и через несколько месяцев исчезают. IgG приходят позже, через 2–4 недели, зато остаются годами, иногда пожизненно, и после прививок тоже.
Результат печатают тремя способами. Качественный: «обнаружено / не обнаружено». Полуколичественный: коэффициент позитивности, отношение сигнала пробы к пороговому; обычно меньше 0,8–0,9 — отрицательно, 0,9–1,1 — серая зона, выше — положительно. Количественный: МЕ/мл или ОЕ/мл, где цифра растёт с количеством антител, но «больше» не означает «тяжелее».
Серая зона — не полуположительный результат. Это сигнал пересдать через 2–3 недели: свежая инфекция за это время даст уверенный рост, а ложный сигнал останется на месте.
ПЦР: анализ ищет самого возбудителя
Полимеразная цепная реакция размножает фрагмент ДНК или РНК возбудителя до количества, которое можно измерить. Поэтому положительная ПЦР означает присутствие возбудителя в пробе здесь и сейчас, а не воспоминание о нём.
Качественная ПЦР отвечает «да / нет». Количественная считает копии на миллилитр, это и есть «вирусная нагрузка» при гепатитах и ВИЧ; по её падению врач видит, работает ли лечение. Результат зависит от материала: мазок из горла, кровь, соскоб — если возбудитель живёт не там, откуда взяли пробу, результат будет отрицательным при реальной инфекции.
Четыре комбинации IgM и IgG
IgM −, IgG −
Контакта не было, либо он был на прошлой неделе и антитела ещё не выработались. При подозрении на свежее заражение пересдают через 2–4 недели или сразу ищут самого возбудителя.
IgM +, IgG −
Возможна свежая инфекция, но IgM — самый капризный класс: он даёт ложноположительные результаты при других инфекциях, аутоиммунных процессах, беременности. Изолированный IgM почти всегда перепроверяют повторной серологией через 2 недели и прямым поиском возбудителя.
IgM +, IgG +
Недавняя или текущая инфекция: IgG уже пришли, IgM ещё не ушли.
IgM −, IgG +
Перенесённая инфекция, прививка, иммунитет. Когда важно, как давно это было, например при цитомегаловирусе или токсоплазме у беременных, смотрят авидность IgG: низкая говорит о заражении в последние 3–4 месяца, высокая — о давнем.
«Окно»: почему антитела бывают рано, а прямой метод — почти нет
Между заражением и появлением антител проходит время, и в этот период серология честно показывает «отрицательно». Для ВИЧ у лабораторных тестов 4-го поколения, которые ловят антитела и антиген p24 одновременно, медиана — 18 дней после заражения, а 99 % инфицированных выявляются к 45-му дню. Поэтому отрицательный результат раньше 6 недель после контакта считается предварительным, и его повторяют.
При гепатите C антитела появляются в среднем через 8–11 недель, а РНК вируса прямой метод находит уже через 1–2 недели. При гепатите B поверхностный антиген HBsAg обнаруживается через 4–10 недель. ПЦР сокращает окно до дней, но и у неё оно есть.
Почему после одного метода просят другой
Положительные антитела к гепатиту C говорят только о встрече с вирусом: у части людей организм справился сам, и вируса давно нет. Поэтому по протоколу CDC после anti-HCV «обнаружено» следует ПЦР на РНК: положительная — инфекция активна, отрицательная — перенесённая или ложный сигнал. Похожая логика при ВИЧ: скрининговый результат подтверждают вторым методом, и диагноз никогда не ставят по одному положительному скринингу.
Обратный порядок тоже бывает. Положительный прямой тест на возбудитель, который может жить в организме бессимптомно, дополняется антителами, чтобы понять, свежая это встреча или давнее носительство.
Частые ситуации из бланков
anti-HCV «обнаружено», ПЦР «не обнаружено»
Самый частый сюжет: перенесённый и завершившийся гепатит либо ложноположительный скрининг. Врач обычно повторяет РНК через 3–6 месяцев, лечения при отрицательной РНК нет.
IgG к цитомегаловирусу положительный при беременности
У 70–90 % взрослых так и есть, это давний контакт. Вопрос только один — не свежее ли заражение, и на него отвечают IgM и авидность IgG.
IgM к хламидиям положительный, IgG отрицательный, жалоб нет
Классический кандидат на ложный IgM. Подтверждение — ПЦР соскоба, а не повторный ИФА крови.
HBsAg отрицательно, anti-HBs 250 МЕ/л
Гепатита B нет, а антитела к нему есть: так выглядит прививка. Значение выше 10 МЕ/л считается защитным.
Коэффициент позитивности 1,05
Серая зона. Не диагноз и не «слабоположительно», а пересдача через 2–3 недели.
Когда к врачу не откладывая
Любой положительный скрининг на ВИЧ, HBsAg или anti-HCV — к инфекционисту в ближайшие дни, не для лечения, а для подтверждения: с одним положительным скринингом диагноза ещё нет, но и тянуть с проверкой нельзя. Положительные IgM при беременности к возбудителям из TORCH-группы — к акушеру-гинекологу сразу, там счёт идёт на недели.
Загрузите бланк с антителами или ПЦР — разложим, какая комбинация у вас, попадает ли результат в окно, и сформулируем вопросы для врача.
Частые вопросы
Что такое ИФА анализ крови?
Иммуноферментный анализ: в крови ищут не самого возбудителя, а антитела к нему — след иммунного ответа. Результат бывает качественным («обнаружено»), полуколичественным (коэффициент позитивности) или количественным (МЕ/мл).
Чем ИФА отличается от ПЦР?
ИФА показывает, что организм встречался с возбудителем и ответил антителами; ПЦР находит ДНК или РНК самого возбудителя, то есть его присутствие прямо сейчас. ПЦР срабатывает через дни после заражения, ИФА — через недели.
Что значит IgG положительный, а IgM отрицательный?
Чаще всего — контакт с возбудителем был давно: перенесённая инфекция или прививка, а свежего заражения нет. Для датировки в спорных случаях смотрят авидность IgG.
Что такое коэффициент позитивности в ИФА?
Отношение сигнала вашей пробы к пороговому: меньше 0,8–0,9 — отрицательно, 0,9–1,1 — серая зона, больше 1,1 — положительно. Границы печатает лаборатория, и серую зону пересдают через 2–3 недели.
Через сколько после контакта ИФА покажет ВИЧ?
Тесты 4-го поколения (антитела + антиген p24) выявляют инфекцию в среднем через 18 дней, а у 99 % — к 45-му дню. Отрицательный результат раньше 6 недель окончательным не считается.
Источники
- Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Immunochemistry, 1971, PMID 5135623 — 1971
- Time Until Emergence of HIV Test Reactivity Following Infection With HIV-1. Clin Infect Dis, 2017, PMID 27737954 — 2017
- Testing for HCV infection: an update of guidance for clinicians and laboratorians. MMWR, 2013, PMID 23657112 — 2013
Материал носит справочный характер и не заменяет консультацию врача. Здесь нет диагнозов и назначений: решение о лечении принимает лечащий специалист по результатам осмотра и полной картины обследования.
Референсные интервалы отличаются между лабораториями и зависят от метода, пола, возраста и беременности. Всегда сверяйтесь с бланком своей лаборатории.
Не хотите разбирать бланк по строчкам?
Загрузите фото или PDF результата — разберём каждый показатель и покажем, о чём стоит спросить врача.
Загрузить анализ — 15 минут